Kit PCR Sensibilité au PTC
Le PTC (PhénylThioCarbamide) est un composé organique amer présent dans certains végétaux comme le chou de Bruxelles ou le brocoli, environ 30 % de la population est sensible à ce composé.
L'objectif de ce TP est de proposer aux élèves d'établir la relation entre phénotype et génotype, à partir de leur propre patrimoine génétique. Le phénotype est caractérisé facilement à l'aide des bandelettes test, le génotype est déterminé par amplification génique du gène TAS2R38 à partir d'un simple prélèvement des cellules de l'épiderme (buccal ou du dessus de la main).
Le gène TAS2R38, localisé sur le chromosome 7, code pour le récepteur au PTC. La variation allélique entre individu repose sur la mutation de 3 nucléotides (SNP = Single Nucleotide Polymorphisme). L'amplification va permette d'identifier un des 3 SNP, car cette mutation correspond à un site de restriction. La PCR est suivie d'une digestion enzymatique, si la mutation est présente, 2 fragments seront visibles (T-), un seul fragment correspond à l'allèle non muté (T+).
Durée amplification : 1h15 min
Durée digestion enzymatique : 20 min
Durée électrophorèse : 15 à 25 min en fonction du système
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